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RNA提取试剂在选择时应考虑的几个点?
发布时间:2020-04-22   点击次数:269次
   RNA提取试剂在选择时应考虑的几个点?
  RNA提取试剂主要用于各种植物、动物、微生物的RNA提取,在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂,非常方便,适合于RNA的快速提取。
  所提取的RNA完整性好、纯度高,可用于分子生物学后实验。但较好的试剂盒价格比较贵,在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用。
  本产品提供了一种快速,简单,经济有效的方法,可从全血,哺乳动物细胞,细菌细胞和真菌细胞中分离总RNA。优化的洗涤剂和离液盐用于裂解细胞并灭活核糖核酸酶。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上,同时使污染物通过柱被有效地洗去。纯的RNA用RE缓冲液洗脱,不用酚提取或醇沉淀。
  那我们在选择RNA提取试剂的时候应考虑哪些因素呢?一起来看看下面的内容吧!
  一:操作简便性
  操作简便性也是拭子提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂,不仅费时费力,还容易导致样本间的交叉污染,也容易损失样本。特别是用于临床检测或样本量较多情况下的检测,操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊,还会影响出检测报告的时间。因而,选用操作简便、流畅的提取试剂盒非常重要。
  二:提取的核酸纯度要高
  一般RNA 溶液OD260/OD280比值应在1.8--2.0之间,如果提取的RNA溶液OD260/OD280比值小于1.8,通常说明有蛋白质或酚、多糖等的污染。如果提取的RNA溶液OD260/OD280>2.0,则表明RNA有降解。不同品牌的试剂盒提取的RNA纯度略有差别。
  三:考虑提取试剂中应含有较高的提取得率
  对离心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜RNA吸附性能好、裂解液细胞裂解能力强、洗脱液洗脱能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果离心柱硅胶膜吸附能力不好,裂解液和洗脱液没有经过很好的优化,RNA提取试剂的提取得率就不高。至于RNA提取得率的确定,我们可以使用紫外分光光度法,但是不能作为判断得率的标准,还是要做个PCR或荧光定量。
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